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  • 槲皮素对H2O2诱导骨关节炎软骨细胞氧化损伤的保护作用与机制研究
    李军, 沈姝霖, 张荣炜, 黄章睿, 梁锐明, 罗世兴
    中华老年骨科与康复电子杂志 . 2026, 12 (02): 85-92.
    摘要 ( 23 ) HTML ( 0 ) PDF ( 3293 ) ( 3 )
    目的

    研究槲皮素(quercetin, Que)对过氧化氢(H2O2)诱导的骨关节炎(osteoarthritis, OA)软骨细胞氧化损伤的保护作用及相关分子机制。

    方法

    体外分离培养乳鼠关节软骨细胞,随机分为正常对照组、模型组(H2O2诱导)及处理组(Que干预组)。采用CCK-8法筛选Que的安全浓度;利用Calcein-AM染色检测细胞活力;以DCFH-DA、DHE、DAF-FM DA及JC-1荧光探针分别检测细胞内ROS、超氧阴离子、NO水平及线粒体膜电位变化;采用免疫荧光和RT-qPCR检测炎症因子及基质降解酶的表达。

    结果

    10~40 μg/mL Que对软骨细胞无明显毒性。与模型组相比,40 μg/mL Que显著提高了细胞活力(P<0.05),降低胞内ROS、超氧阴离子及NO水平,并改善H2O2导致的线粒体膜电位下降(P<0.05)。同时,Que可显著下调MMP-13、IL-6蛋白表达,以及MMP-3、MMP-13、IL-1β、IL-6 mRNA的表达(P<0.05)。

    结论

    槲皮素可通过清除活性氧、抑制NO生成、维持线粒体功能,减轻H2O2诱导的软骨细胞氧化应激与炎症反应,对OA软骨细胞具有保护作用,有望成为骨关节炎治疗的天然候选药物。

图3 氧化应激及线粒体功能染色结果注:A,C,E:分别采用DCFH-DA、DHE和DAF-FM DA荧光探针染色观察各组细胞内总活性氧(ROS)、超氧阴离子(O2-)和一氧化氮(NO)水平(标尺= 50 μm);B,D,F:分别为A、C、E对应指标的平均荧光强度定量分析结果。G:JC-1染色观察线粒体膜电位变化,红色荧光代表高膜电位状态(J-聚集体),绿色荧光代表低膜电位状态(单体)(标尺= 50 μm);H,I:分别为JC-1聚集体(红色)与单体(绿色)的平均荧光强度定量分析。*P<0.05,**P<0.01,***P<0.001,****P<0.0001
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